이번에는 동물실험용 디바이스부터 시약, 세포독성·산화스트레스 분석 키트까지 성격이 다른 제품 6종을 충북 소재 CRO에 한 번에 납품했습니다. 제품마다 제조사와 구매 경로가 달랐는데, 발주 후 가장 빠른 제품은 약 10일, 해외에서 들어온 rNSET는 약 3주 반 만에 납품을 완료했습니다. 도단은 대전에서 전국 어느 기관이든 이렇게 여러 곳의 제품을 한꺼번에 모아서 납품해 드립니다.
먼저 ParaTechs의 [크기=크게]rNSET™ (Non-Surgical Embryo & Sperm Transfer) Device for Rats/크기 1박스(박스당 10개입)입니다. NSET는 수술 없이 자궁경부를 통해 배아를 이식하는 일회용 카테터 디바이스이고, 이번 제품은 이름대로 래트(rat)용입니다. 제가 확인한 자료는 마우스용 NSET에 대한 2009년 BioTechniques 논문이었는데, 이 논문에는 수술 없이 마취 없이 몇 초 안에 이식할 수 있고 수술에 따른 통증·마취·감염 위험을 줄이는 것이 장점이라고 설명돼 있습니다. 같은 논문에서 20개의 배반포 이식으로 한배에서 평균 약 7마리의 새끼를 얻었다는 결과도 소개돼 있습니다. 다만 래트용 rNSET 자체의 사양이나 성적은 이번에 확인하지 못했으니, 래트에서의 구체적인 사용법은 제조사의 안내서를 따라 주세요. 논문에 따르면 ParaTechs는 이 디바이스를 판매하는 회사입니다.
다음은 Sigma-Aldrich의 [크기=크게]Lipopolysaccharides from Escherichia coli O26:B6/크기 1mg 5개입니다. LPS(지질다당체)는 그람음성균 세포벽 성분으로, 면역세포의 TLR4 수용체를 자극해 염증 반응을 일으키는 시약이라 염증 모델을 만들 때 많이 씁니다. Sigma 페이지에는 이 제품이 감마선 조사(γ-irradiated)된 동결건조 분말이고 겔 여과 크로마토그래피로 정제했으며, 단백질은 5% 미만, 세포배양용으로 쓸 수 있다고 안내돼 있습니다. 사람 PBMC, 마우스 골수 유래 수지상세포, 래트 성상세포 등에서 사이토카인 분비를 유도하는 용도로 쓰인다고 합니다. 보관은 2~8°C이고, 1mg 바이알에 멸균 완충액이나 배지 1mL를 넣어 부드럽게 녹이라고 안내돼 있습니다. 페이지에는 엔도톡신 활성(potency) 수치가 나와 있지 않아서, 로트별 수치는 분석증명서(COA)를 확인하셔야 합니다. 또한 급성 독성(경구) 표시가 있는 시약이라 취급에 주의가 필요합니다.
Biosesang의 [크기=크게]20X PBS/크기 10L 1개는 20배 농축 인산완충식염수입니다. 사용 전에 증류수로 20배 희석해서 쓰는 형태라 보관과 운반이 편리하고, 세척, 시료 희석, 면역염색 등 거의 모든 실험의 기본 완충액으로 쓰입니다. 이 제품의 구체적인 조성과 pH는 이번에 제조사 페이지에서 확인하지 못했습니다.
[크기=크게]Normal goat serum/크기 100ml 1개는 Merck(MilliporeSigma)의 염소 정상 혈청입니다. 면역염색에서 블로킹(blocking) 용도로 쓰는 것이 일반적인데, 2차 항체가 염소에서 만든 항체일 때 같은 종의 혈청으로 블로킹하면 비특이적 결합을 줄여 준다고 알려져 있습니다. 이번 판매처 페이지에는 용도, 멸균 여부, 보관 조건 설명이 없어서 이 부분은 일반적인 사용법 기준이며, 정확한 사양은 제조사 데이터시트를 확인하시는 것이 좋습니다.
Roche의 [크기=크게]Cytotoxicity Detection Kit (LDH)/크기 1kit는 세포가 손상될 때 세포막이 터지면서 배양액으로 새어 나오는 **LDH(젖산탈수소효소)**의 양을 재서 세포독성을 확인하는 키트입니다. Sigma 페이지에는 비방사성 비색(colorimetric) 분석이고 490nm에서 흡광도를 측정하며, 96웰 플레이트에서 빠르게 진행할 수 있다고 안내돼 있습니다. 키트는 촉매(diaphorase/NAD+)와 염료 용액(INT와 젖산나트륨) 두 가지로 구성되고, 최대 약 2,000회 분량으로 표시돼 있습니다. 보관은 -20°C로 안내돼 있고, 반응액은 사용 직전에 만들어 쓰는 것이 원칙입니다. 화합물의 독성 평가, 세포 매개 독성, 생체재료의 생체적합성 평가 등에 두루 쓰입니다.
마지막으로 Invitrogen의 [크기=크게]CellROX Deep Red/크기입니다. 살아 있는 세포 안의 **활성산소(ROS, 산화스트레스)**를 형광으로 보는 시약으로, Thermo Fisher 페이지에는 여기/방출 파장이 644/665nm의 far-red 계열이라고 안내돼 있습니다. 2.5 mM DMSO 원액이 50 µL씩 5개 들어 있고, 형광현미경, 하이컨텐트 스크리닝, 유세포분석에 쓸 수 있으며, 혈청이 든 배지에 바로 넣어도 된다고 합니다. GFP를 발현시킨 세포에서는 H2DCFDA와 형광이 겹쳐 쓰기 어려운데, 이런 경우의 대안으로 소개된 제품이라고 합니다. 보관은 -20°C 이하, 빛 차단, 건조이고, 알코올 계열 고정액은 피하라는 안내가 있습니다.
메이커 중 Sigma-Aldrich(Merck)와 Thermo Fisher(Invitrogen)는 연구용 시약 분야에서 널리 알려진 회사이고, Roche는 분자생물학 시약과 키트로 오래 알려진 회사입니다.
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